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总论1

第一篇 生物化学实验基本操作、基本技术及原理2

第一章 实验室基本要求2

第二章 实验室基本操作5

第三章 实验样品的制备11

第四章 分光光度法及比色分析法14

第五章 电泳技术19

第六章 层析技术23

第七章 离心分离技术27

第二篇 生物化学基本实验30

实验一 微量凯氏定氮法测定蛋白质的含量30

实验二 双缩脲法测定蛋白质的含量32

实验三 Folin-酚试剂法测定蛋白质的含量34

实验四 紫外分光光度法测定蛋白质的含量36

实验五 蛋白质及氨基酸的呈色反应37

实验六 蛋白质的两性解离和等电点的测定39

实验七 蛋白质的沉淀和变性实验41

实验八 血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳43

实验九 pH、温度、激动剂和抑制剂对酶活性的影响45

实验十 米氏常数的测定48

实验十一 乳酸脱氢酶及辅酶Ⅰ52

实验十二 碱性磷酸酶的提取、比活性测定54

实验十三 血清淀粉酶的测定56

实验十四 琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制58

实验十五 维生素C的提取及定量测定60

实验十六 邻甲苯胺法测定血糖61

实验十七 葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度64

实验十八 Folin-吴宪法测定血糖浓度65

实验十九 饱食和饥饿对肝糖原含量的影响67

实验二十 糖酵解中间产物的鉴定69

实验二十一 肝糖原的提取与鉴定70

实验二十二 细胞色素C的分离制备和测定72

实验二十三 琼脂糖凝胶电泳分离血浆脂蛋白75

实验二十四 肝脏中酮体生成作用76

实验二十五 血清甘油三酯的测定77

实验二十六 血清总胆固醇的测定（高铁—硫酸显色法）79

实验二十七 脂肪酸的β-氧化—酮体测定法82

实验二十八 血清无机磷的测定84

实验二十九 血清钙的测定86

实验三十 尿中的肌酐、尿酸含量测定87

实验三十一 改良J-G法测定血清总胆红素和结合胆红素90

实验三十二 金氏法测定血清谷丙转氨酶活性92

第三篇 综合性实验95

实验三十三 垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）分离血清蛋白95

实验三十四 SDS-PAGE测定蛋白质的相对分子质量99

实验三十五 异常血红蛋白的筛查104

实验三十六 血清白蛋白的分离、纯化与鉴定106

实验三十七 DEAE—离子交换剂纯化血清IgG106

实验三十八 鸡卵类黏蛋白的分离纯化、活性及相对分子质量的测定110

实验三十九 应用PCR技术扩增Hb基因114

实验四十 DNA琼脂糖凝胶电泳116

实验四十一 紫外吸收法测定DNA含量117

实验四十二 质粒DNA的提取与定量118

实验四十三 DNA的限制性酶切反应120

实验四十四 目的DNA片段的回收121

实验四十五 大肠杆菌感受态细胞的制备123

实验四十六 DNA体外重组、转化及阳性克隆的筛选124

实验四十七 总RNA的提取及RT-PCR扩增目的基因126

实验四十八 蛋白质印迹（western blotting）130

实验四十九 southern印迹杂交133

附录141

附录一 铬酸洗液的配制方法141

附录二 常用酸碱体积分数、相对密度和物质的量浓度的关系143

附录三 常用单位及转换144

附录四 常用酸碱溶液的密度和浓度147

附录五 常用缓冲溶液的配制方法148

附录六 危险试剂及其保存155

附录七 生物化学实验常用柱料数据及性质159