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第1部分 概述1

目录1

1 转基因动物技术导言3

1.1 引言3

1.2 历史沿革3

1.3 本书的应用与纵览7

参考文献10

第2部分 针对小鼠模型的转基因动物的制作13

2.1 引言15

2 DNA显微注射与转基因动物的制作15

2.2 一般方法16

2.3 总结49

致谢50

参考文献50

附录52

3 影响转基因动物制作的因素57

3.1 引言57

3.2 准备工作58

3.3 故障排除71

3.4 转基因现象学75

3.5 总结83

致谢83

参考文献84

4 胚胎干细胞基因打靶：Ⅰ．历史与方法学86

4.1 胚胎的干细胞86

4.2 胚胎干细胞基因打靶93

4.3 方法98

参考文献104

致谢104

5 胚胎干细胞基因打靶：Ⅱ．条件性技术109

5.1 引言110

5.2 条件性模型建立简史111

5.3 Cre/loxP系统综述、建立与检验111

5.4 Cre/loxP与转基因模型113

5.5 方法123

5.6 总结128

参考文献128

致谢128

6 逆转录病毒介导的基因转移134

6.1 引言与讨论134

6.2 方法144

参考文献147

致谢147

7 细胞核移植技术151

7.1 引言与讨论151

7.2 材料与设备155

7.3 显微工具的准备157

7.4 着床前胚胎的细胞核移植160

7.5 胚胎干细胞和体细胞的细胞核移植171

致谢175

参考文献175

第3部分 实验和家养转基因物种的制作177

8 转基因大鼠的制作179

8.1 引言179

8.2 大鼠的重要性180

8.3 转基因大鼠的作用181

8.4 制作182

8.5 结论188

参考文献189

9 转基因兔的制作192

9.1 转基因兔的应用192

9.2 转基因实验过程中兔胚胎的操作193

9.3 材料与方法194

参考文献198

10 转基因鱼的制作199

10.1 引言199

10.2 讨论200

10.3 基因转移的方法200

10.4 转基因谱系的建立和维持207

10.5 转基因鱼护养与牵制210

致谢210

10.6 转基因鱼的未来210

参考文献211

11 转基因家禽的制作214

11.1 引言与讨论214

11.2 方法221

11.3 总结232

参考文献232

12 通过DNA显微注射制作转基因猪235

12.1 引言与讨论236

12.2 方法240

12.3 制作转基因猪的另外方法249

12.4 总结251

参考文献251

13 通过DNA显微注射制作转基因反刍动物259

13.1 引言259

13.2 适于显微注射合子的制作260

13.3 反刍动物合子的显微注射264

13.4 显微注射胚胎的移植268

13.5 应用领域与展望271

参考文献272

致谢272

14 转基因非人灵长类的制作275

14.1 引言与讨论276

14.2 方法283

14.3 总结293

致谢294

参考文献294

15 牛、绵羊和猪的细胞核移植技术306

15.1 引言306

15.2 一般方法307

15.3 总结320

致谢320

参考文献320

第4部分 分子生物学、分析及实现技术323

16 转基因表达的载体设计325

16.1 引言325

16.2 转录区326

16.3 启动子335

16.4 边界区336

16.5 结论与展望346

参考文献347

致谢347

17.2 转基因检测357

17 转基因整合分析357

17.1 引言357

17.3 转基因的评估参数359

17.4 转基因的分析359

17.5 转基因谱系的建立363

17.6 纯合子小鼠的衍生365

17.7 总结366

参考文献366

18 转基因整合检测的PCR方法优化368

18.1 引言368

18.2 讨论369

18.3 总结374

参考文献374

19 转基因表达的分析376

19.1 引言376

19.2 转基因RNA转录物稳态水平的分析378

19.3 转基因蛋白质产物稳态水平的分析386

19.4 结论394

参考文献394

20.1 引言397

20 农用动物辅助生殖技术与胚胎培养方法397

20.2 辅助生殖技术398

20.3 新辅助生殖技术的发展424

20.4 总结426

参考文献427

21 资料库、互联网资源和遗传学命名法441

21.1 引言441

21.2 转基因和定点突变资料库和电子资源442

21.3 转基因和定点突变动物的标准命名455

参考文献459

附录461

附录1 另外的小鼠数据库和网络资源463

附录2 大鼠数据库和网络资源467

附录3 猪的数据库和网络资源468

附录4 绵羊的数据库和网络资源469

附录5 牛的数据库和网络资源469

附录6 禽类的数据库和网络资源470

附录7 鱼的数据库和网络资源470

索引471